篇一 大学化学实验报告
大学化学实验报告1
实验题目:溴乙烷的合成
实验目的:
1、学习从醇制备溴乙烷的原理和方法
2、巩固蒸馏的操作技术和学习分液漏斗的使用。
实验原理:
主要的副反应:
反应装置示意图:
(注:在此画上合成的装置图)
实验步骤及现象记录:
实验步骤
现象记录
1、加料:
将9.0ml水加入100ml圆底烧瓶,在冷却和不断振荡下,慢慢地加入19.0ml浓硫酸。冷至室温后,再加入10ml95%乙醇,然后在搅拌下加入13.0g研细的溴化钠,再投入2-3粒沸石。
放热,烧瓶烫手。
2、装配装置,反应:
装配好蒸馏装置。为防止产品挥发损失,在接受器中加入5ml40%nahso3溶液,放在冰水浴中冷却,并使接受管(具小咀)的末端刚好浸没在接受器的水溶液中。用小火加热石棉网上的烧瓶,瓶中物质开始冒泡,控制火焰大小,使油状物质逐渐蒸馏出去,约30分钟后慢慢加大火焰,直到无油滴蒸出为止。
加热开始,瓶中出现白雾状hbr。稍后,瓶中白雾状hbr增多。瓶中原来不溶的固体逐渐溶解,因溴的生成,溶液呈橙黄色。
3、产物粗分:
将接受器中的液体倒入分液漏斗中。静置分层后,将下层的粗制溴乙烷放入干燥的小锥形瓶中。将锥形瓶浸于冰水浴中冷却,逐滴往瓶中加入浓硫酸,同时振荡,直到溴乙烷变得澄清透明,而且瓶底有液层分出(约需4ml浓硫酸)。用干燥的分液漏斗仔细地分去下面的硫酸层,将溴乙烷层从分液漏斗的上口倒入30ml蒸馏瓶中。
接受器中液体为浑浊液。分离后的溴乙烷层为澄清液。
4、溴乙烷的精制
配蒸馏装置,加2-3粒沸石,用水浴加热,蒸馏溴乙烷。收集37-40℃的馏分。收集产品的接受器要用冰水浴冷却。无色液体,样品+瓶重=30.3g,其中,瓶重20.5g,样品重9.8g。
5、计算产率。
理论产量:0.126×109=13.7g
产率:9.8/13、7=71.5%
结果与讨论:
(1)溶液中的橙黄色可能为副产物中的溴引起。
(2)最后一步蒸馏溴乙烷时,温度偏高,致使溴乙烷逸失,产量因而偏低,以后实验应严格操作。
大学化学实验报告2
一、实验目的
用已知浓度溶液标准溶液)本实验盐酸为标准溶液测定未知溶液(待测
溶液)浓度本实验氢氧化钠为待测溶液
二、实验原理
在酸碱中和反应中,使用一种的酸(或碱)溶液跟的碱(或酸)溶液完全中和,测出二者的,再根据化学方程式中酸和碱的物质的量的比值,就可以计算出碱(或酸)溶液的浓度。计算公式:c(naoh)?
c(hcl)?v(hcl)c(naoh)?v(naoh)
或c(hcl)?。
v(naoh)v(hcl)
三、实验用品
酸式滴定管、碱式滴定管、锥形瓶、铁架台、滴定管夹、0、1000mol/l盐酸(标准液)、未知浓度的naoh溶液(待测液)、酚酞(变色范围8、2~10)
1、酸和碱反应的实质是。
2、酸碱中和滴定选用酚酞作指示剂,但其滴定终点的变色点并不是ph=7,这样对中和滴定终点的判断有没有影响?
3、滴定管和量筒读数时有什么区别?
四、数据记录与处理
五、问题讨论
酸碱中和滴定的关键是什么?
大学化学实验报告3
一、实验目的:
1、培养同学们“通过实验手段用已知测未知”的实验思想。
2、学习相关仪器的使用方法,掌握酸碱滴定的原理及操作步骤、
3、实现学习与实践相结合。
二、实验仪器及药品:
仪器:滴定台一台,25ml酸(碱)滴定管各一支,10ml移液管一支,250ml锥形瓶两个。
药品:0、1mol/lnaoh溶液,0、1mol/l盐酸,0、05mol/l草酸(二水草酸),酚酞试剂,甲基橙试剂。
三、实验原理:
中和滴定是酸与碱相互作用生成盐和水的反应,通过实验手段,用已知测未知。即用已知浓度的酸(碱)溶液完全中和未知浓度的'碱(酸)溶液,测定出二者的体积,然后根据化学方程式中二者的化学计量数,求出未知溶液的浓度。酸碱滴定通常用盐酸溶液和氢氧化钠溶液做标准溶液,但是,由于浓盐酸易挥发,氢氧化钠易吸收空气中的水和二氧化碳,故不能直接配制成准确浓度的溶液,一般先配制成近似浓度溶液,再用基准物标定。本实验用草酸(二水草酸)作基准物。
⑴氢氧化钠溶液标定:h2c2o4+2naoh=na2c2o4+2h2o
反应达到终点时,溶液呈弱碱性,用酚酞作指示剂。(平行滴定两次)
⑵盐酸溶液标定:hcl+naoh=nacl+h2o
反应达到终点时,溶液呈弱酸性,用甲基橙作指示剂。(平行滴定两次)
四、实验内容及步骤:
1、仪器检漏:对酸(碱)滴定管进行检漏
2、仪器洗涤:按要求洗涤滴定管及锥形瓶,并对滴定管进行润洗
3、用移液管向两个锥形瓶中分别加入10、00ml草酸(二水草酸),再分别滴入两滴酚酞、向碱式滴定管中加入药品至零刻线以上,排尽气泡,调整液面至零刻线,记录读数。
4、用氢氧化钠溶液滴定草酸(二水草酸)溶液,沿同一个方向按圆周摇动锥形瓶,待溶液由无色变成粉红色,保持30秒不褪色,即可认为达到终点,记录读数。
5、用移液管分别向清洗过的两个锥形瓶中加入10、00ml氢氧化钠溶液,再分别滴入两滴甲基橙。向酸式滴定管中加入盐酸溶液至零刻线以上2—3cm,排尽气泡,调整液面至零刻线,记录读数。
6、用盐酸溶液滴定氢氧化钠溶液,待锥形瓶中溶液由黄色变为橙色,并保持30秒不变色,即可认为达到滴定终点,记录读数。
7、清洗并整理实验仪器,清理试验台。
五、数据分析:
1、氢氧化钠溶液浓度的标定:酸碱滴定实验报告
2、盐酸溶液浓度的标定:酸碱滴定实验报告
六、实验结果:
①测得氢氧化钠溶液的物质的量浓度为0、100mol/l
②测得盐酸的物质的量浓度为0、1035mol/l
七、误差分析:
判断溶液浓度误差的宗旨是待测溶液的浓度与消耗标准液的体积成正比。
引起误差的可能因素以及结果分析:①视(读数)②洗(仪器洗涤)③漏(液体溅漏)
④泡(滴定管尖嘴气泡)⑤色(指示剂变色控制与选择)
八、注意事项:
①滴定管必须用相应待测液润洗2—3次
②锥形瓶不可以用待测液润洗
③滴定管尖端气泡必须排尽
④确保终点已到,滴定管尖嘴处没有液滴
⑤滴定时成滴不成线,待锥形瓶中液体颜色变化较慢时,逐滴加入,加一滴后把溶液摇匀,观察颜色变化。接近终点时,控制液滴悬而不落,用锥形瓶靠下来,再用洗瓶吹洗,摇匀。
⑥读数时,视线必须平视液面凹面最低处。
大学化学实验报告4
实验名称:酸碱中和滴定
时间实验(分组)桌号合作者指导老师
一:实验目的:
用已知浓度溶液(标准溶液)本实验盐酸为标准溶液测定未知溶液(待测溶液)浓度本实验氢氧化钠为待测溶液
二:实验仪器:
酸式滴定管、碱式滴定管、锥形瓶、铁架台(含滴定管夹)。
实验药品:0、1000mol/l盐酸(标准溶液)、未知浓度的naoh溶液(待测溶液)、酸碱指示剂:酚酞(变色范围8~10)或者甲基橙(3、1~4、4)
三:实验原理:
c(标)×v(标)=c(待)×v(待)假设反应计量数之比为1:1本实验具体为:c(h+)×v(酸)=c(oh—)×v(碱)
四:实验过程:
(一)滴定前的准备阶段
1、检漏:检查滴定管是否漏水(具体方法:酸式滴定管,将滴定管加水,关闭活塞。静止放置5min,看看是否有水漏出。有漏必须在活塞上涂抹凡士林,注意不要涂太多,以免堵住活塞口。碱式滴定管检漏方法是将滴定管加水,关闭活塞。静止放置5min,看看是否有水漏出。如果有漏,必须更换橡皮管。)
2、洗涤:先用蒸馏水洗涤滴定管,再用待装液润洗2~3次。锥形瓶用蒸馏水洗净即可,不得润洗,也不需烘干。
3、量取:用碱式滴定管量出一定体积(如20、00ml)的未知浓度的naoh溶液(注意,调整起始刻度
在0或者0刻度以下)注入锥形瓶中。
用酸式滴定管量取标准液盐酸,赶尽气泡,调整液面,使液面恰好在0刻度或0刻度以下某准确刻度,记录读数
v1,读至小数点后第二位。
(二)滴定阶段
1、把锥形瓶放在酸式滴定管的下面,向其中滴加1—2滴酚酞(如颜色不明显,可将锥形瓶放在白瓷板上或者白纸上)。将滴定管中溶液逐滴滴入锥形瓶中,滴定时,右手不断旋摇锥形瓶,左手控制滴定
管活塞,眼睛注视锥形瓶内溶液颜色的变化,直到滴入一滴盐酸后溶液变为无色且半分钟内不恢复原色。此时,氢氧化钠恰好完全被盐酸中和,达到滴定终点。记录滴定后液面刻度v2。
2、把锥形瓶内的溶液倒入废液缸,用蒸馏水把锥形瓶洗干净,将上述操作重复2~3次。
(三)实验记录
(四)、实验数据纪录:
五、实验结果处理:
c(待)=c(标)×v(标)/v(待)注意取几次平均值。
六、实验评价与改进:
[根据:c(h+)×v(酸)=c(oh—)×v(碱)分析]
大学化学实验报告
篇二 大学化学的酸碱滴定实验报告
大学化学的酸碱滴定实验报告
大学化学的酸碱滴定实验报告1
一、实验目的:
1、培养同学们“通过实验手段用已知测未知”的实验思想。
2、学习相关仪器的使用方法,掌握酸碱滴定的原理及操作步骤、
3、实现学习与实践相结合。
二、实验仪器及药品:
仪器:滴定台一台,25ml酸(碱)滴定管各一支,10ml移液管一支,250ml锥形瓶两个。
药品:0、1mol/lnaoh溶液,0、1mol/l盐酸,0、05mol/l草酸(二水草酸),酚酞试剂,甲基橙试剂。
三、实验原理:
中和滴定是酸与碱相互作用生成盐和水的反应,通过实验手段,用已知测未知。即用已知浓度的酸(碱)溶液完全中和未知浓度的碱(酸)溶液,测定出二者的体积,然后根据化学方程式中二者的化学计量数,求出未知溶液的浓度。酸碱滴定通常用盐酸溶液和氢氧化钠溶液做标准溶液,但是,由于浓盐酸易挥发,氢氧化钠易吸收空气中的水和二氧化碳,故不能直接配制成准确浓度的溶液,一般先配制成近似浓度溶液,再用基准物标定。本实验用草酸(二水草酸)作基准物。
⑴氢氧化钠溶液标定:h2c2o4+2naoh=na2c2o4+2h2o
反应达到终点时,溶液呈弱碱性,用酚酞作指示剂。(平行滴定两次)
⑵盐酸溶液标定:hcl+naoh=nacl+h2o
反应达到终点时,溶液呈弱酸性,用甲基橙作指示剂。(平行滴定两次)
四、实验内容及步骤:
1、仪器检漏:对酸(碱)滴定管进行检漏
2、仪器洗涤:按要求洗涤滴定管及锥形瓶,并对滴定管进行润洗
3、用移液管向两个锥形瓶中分别加入10、00ml草酸(二水草酸),再分别滴入两滴酚酞、向碱式滴定管中加入药品至零刻线以上,排尽气泡,调整液面至零刻线,记录读数。
4、用氢氧化钠溶液滴定草酸(二水草酸)溶液,沿同一个方向按圆周摇动锥形瓶,待溶液由无色变成粉红色,保持30秒不褪色,即可认为达到终点,记录读数。
5、用移液管分别向清洗过的两个锥形瓶中加入10、00ml氢氧化钠溶液,再分别滴入两滴甲基橙。向酸式滴定管中加入盐酸溶液至零刻线以上2—3cm,排尽气泡,调整液面至零刻线,记录读数。
6、用盐酸溶液滴定氢氧化钠溶液,待锥形瓶中溶液由黄色变为橙色,并保持30秒不变色,即可认为达到滴定终点,记录读数。
7、清洗并整理实验仪器,清理试验台。
五、数据分析:
1、氢氧化钠溶液浓度的标定:酸碱滴定实验报告
2、盐酸溶液浓度的标定:酸碱滴定实验报告
六、实验结果:
①测得氢氧化钠溶液的物质的量浓度为0、100mol/l
②测得盐酸的物质的量浓度为0、1035mol/l
七、误差分析:
判断溶液浓度误差的宗旨是待测溶液的浓度与消耗标准液的体积成正比。
引起误差的可能因素以及结果分析:①视(读数)②洗(仪器洗涤)③漏(液体溅漏)
④泡(滴定管尖嘴气泡)⑤色(指示剂变色控制与选择)
八、注意事项:
①滴定管必须用相应待测液润洗2—3次
②锥形瓶不可以用待测液润洗
③滴定管尖端气泡必须排尽
④确保终点已到,滴定管尖嘴处没有液滴
⑤滴定时成滴不成线,待锥形瓶中液体颜色变化较慢时,逐滴加入,加一滴后把溶液摇匀,观察颜色变化。接近终点时,控制液滴悬而不落,用锥形瓶靠下来,再用洗瓶吹洗,摇匀。
⑥读数时,视线必须平视液面凹面最低处。
大学化学的酸碱滴定实验报告2
实验名称:酸碱中和滴定
时间实验(分组)桌号合作者指导老师
一:实验目的':
用已知浓度溶液(标准溶液)本实验盐酸为标准溶液测定未知溶液(待测溶液)浓度本实验氢氧化钠为待测溶液
二:实验仪器:
酸式滴定管、碱式滴定管、锥形瓶、铁架台(含滴定管夹)。
实验药品:0、1000mol/l盐酸(标准溶液)、未知浓度的naoh溶液(待测溶液)、酸碱指示剂:酚酞(变色范围8~10)或者甲基橙(3、1~4、4)
三:实验原理:
c(标)×v(标)=c(待)×v(待)假设反应计量数之比为1:1本实验具体为:c(h+)×v(酸)=c(oh—)×v(碱)
四:实验过程:
(一)滴定前的准备阶段
1、检漏:检查滴定管是否漏水(具体方法:酸式滴定管,将滴定管加水,关闭活塞。静止放置5min,看看是否有水漏出。有漏必须在活塞上涂抹凡士林,注意不要涂太多,以免堵住活塞口。碱式滴定管检漏方法是将滴定管加水,关闭活塞。静止放置5min,看看是否有水漏出。如果有漏,必须更换橡皮管。)
2、洗涤:先用蒸馏水洗涤滴定管,再用待装液润洗2~3次。锥形瓶用蒸馏水洗净即可,不得润洗,也不需烘干。
3、量取:用碱式滴定管量出一定体积(如20、00ml)的未知浓度的naoh溶液(注意,调整起始刻度
在0或者0刻度以下)注入锥形瓶中。
用酸式滴定管量取标准液盐酸,赶尽气泡,调整液面,使液面恰好在0刻度或0刻度以下某准确刻度,记录读数
v1,读至小数点后第二位。
(二)滴定阶段
1、把锥形瓶放在酸式滴定管的下面,向其中滴加1—2滴酚酞(如颜色不明显,可将锥形瓶放在白瓷板上或者白纸上)。将滴定管中溶液逐滴滴入锥形瓶中,滴定时,右手不断旋摇锥形瓶,左手控制滴定
管活塞,眼睛注视锥形瓶内溶液颜色的变化,直到滴入一滴盐酸后溶液变为无色且半分钟内不恢复原色。此时,氢氧化钠恰好完全被盐酸中和,达到滴定终点。记录滴定后液面刻度v2。
2、把锥形瓶内的溶液倒入废液缸,用蒸馏水把锥形瓶洗干净,将上述操作重复2~3次。
(三)实验记录
(四)、实验数据纪录:
五、实验结果处理:
c(待)=c(标)×v(标)/v(待)注意取几次平均值。
六、实验评价与改进:
[根据:c(h+)×v(酸)=c(oh—)×v(碱)分析]
大学化学的酸碱滴定实验报告3
一、实验目的
用已知浓度溶液标准溶液)本实验盐酸为标准溶液测定未知溶液(待测
溶液)浓度本实验氢氧化钠为待测溶液
二、实验原理
在酸碱中和反应中,使用一种的酸(或碱)溶液跟的碱(或酸)溶液完全中和,测出二者的,再根据化学方程式中酸和碱的物质的量的比值,就可以计算出碱(或酸)溶液的浓度。计算公式:c(naoh)?
c(hcl)?v(hcl)c(naoh)?v(naoh)
或c(hcl)?。
v(naoh)v(hcl)
三、实验用品
酸式滴定管、碱式滴定管、锥形瓶、铁架台、滴定管夹、0、1000mol/l盐酸(标准液)、未知浓度的naoh溶液(待测液)、酚酞(变色范围8、2~10)
1、酸和碱反应的实质是。
2、酸碱中和滴定选用酚酞作指示剂,但其滴定终点的变色点并不是ph=7,这样对中和滴定终点的判断有没有影响?
3、滴定管和量筒读数时有什么区别?
四、数据记录与处理
五、问题讨论
酸碱中和滴定的关键是什么?
大学化学的酸碱滴定实验报告
篇三 大学化学创新实验报告
大学化学创新实验报告模板
这次参加创新实验,让我受益匪浅。回想起过去一年里参加创新实验的过程, 从开始的找老师寻找课题到撰写项目申请书,到查阅相关参考资料,咨询相关老师学长,确定实施方案与寻找创新点到撰写项目任务书; 并制定详细的研究方案和步骤;整个实验过程使我学到了很多我所感兴趣的、与专业有关的东西,更重要的是我的动手能力、创新能力、思维能力、团队协作能力都得到了锻炼。在实验初期,由于知识方面的欠缺,实验进度很慢,而且好多失败。通过询问指导老师、咨询技术员,查阅相关资料和组员们的思考讨论,找出了失败的原因。在此过程中我深刻的体会到实验最重要的是细心和耐心不怕失败的决心。最后我们采用单一循环法调整实验中配方的组成,设计出跟自己原料相符的配方,最后取得了预期成果。
能力培养方面
首先是创新思维的整体提升,在自己的已有的知识层面上进行陌生知识的学习与理解,不仅仅是学习难度的提升,更是创新意识的培养。大二上学期接触水性木器漆,刚开始对这方面一窍不通,学习难度很大,很多知识对于我们的眼界都是很难想象的,有时候更是一脸茫然的,陌生带给我们恐惧与畏怯,但同时带给我们惊奇与渴望。这期间让我在创新思维上有了提升。
其次在合作能力上,也得到了很大的提升。创新实验内容较多,历时较长,仅靠一个人的努力很难获得成功。从项目开始到结尾,每个人都时刻在提出自己的意见与学习心得,工作的`分担以及相互的交流让我少走了很多弯路。
最后在创新实践方面,最深的体会就是首先要确定创新的方向和目标,其次善于勤于思考,主动动手动脑。创新实验是一个长期的,复杂的实验,不是只要按着老师讲的步骤做就行了。每一步都需要独立思考。其中会遇到很多困难,这个时候除了寻找帮助,最重要的还是自己思考。通过思考与改进,使实验产品更加完善。
素质提高方面
通过这次大学生创新实验项目,不仅在学习实践方面收获颇多,也让我在为人处事方面更加成熟稳重。创新实验极大地磨砺了我的耐心与细心,也让我学会了坚持与不怕失败的精神,我的与人沟通的能力也有所提升,结识了不少良师益友。与此同时,它也提高了扩展思维能力增强了合作意识,在实践方面也有很大的提升。希望以后还能更多地参加类似的活动,充实我的大学生活。
过去一年的实验过程使我学到了很多我所感兴趣的、与专业有关的东西,更重要的是我的动手能力、创新能力、思维能力、团队协作能力都得到了锻炼,此外创新实验极大地磨砺了我的耐心与细心。在实验初期,由于知识方面和经验方面的欠缺,实验一直失败。通过询问指导老师,查阅相关资料和我们的积极思考
讨论,最终找到了失败的原因。在此过程中我深刻的体会到实验最重要的是细心和耐心不怕失败的决心。最后我们采用单一循环法调整实验中配方的组成,设计出跟自己原料相符的配方,最后取得了预期成果。
大学化学创新实验报告模板
篇四 大学化学专业实习报告
关于大学化学专业实习报告
生产实习是学校为锻炼本科生能力,让我们能更好的与社会相适应而组织的大三本科生的生产实践活动,化学专业实习报告。接到要去生产实习的通知后,我很高兴,并积极联系,终于将实习地点定在大庆油田水处理与化学研究所。这是因为:首先,水化室的主要工作是油田水处理,化学剂量开发及检验,和我们的专业有一定的关系;其次,我们的课程当中并未涉及到有关水生细菌的详细知识,在这里进行生产实习可以扩展这方面的知识;我们在实验中所学习的操作方法可以得到应用基于以上几方面的原因,我选择在水处理所开始我的生产实习。
水处理与化学研究所隶属于大庆油田工程设计开发有限公司,原名大庆油田建设设计水处理及油田化学研究室(水化室)位于黑龙江省大庆市让胡路区油田设计院。多年来研制出原油破乳剂、油田清防蜡剂、油田防蜡剂、原油降粘剂、原油消泡剂、污水絮凝剂、防垢剂、缓蚀剂等12个系列40余种油田化学剂。
该所现有高中级职称的专业人才32人,博士2人,硕士8人,实习报告《化学专业实习报告》。xx年通过了国家级计量认证。同年与哈尔滨工业大学强强联合,成立了哈尔滨工业大学环境科学与工程大庆研发中心。拥有研究仪器设备100多台(套),其中进口设备占60%实验室总面积为3000平方米。微生物实验室,可进行菌种培养驯化分离。拥有国内规模装备最为先进的三次采油实验室,可进行各种除油及过滤工艺和设备试验可自动合成的高压聚合反应实验室。
由于我的实习时间只有三个星期,故在刘老师的安排下对srb做些认知性的实习,以下为我的主要实习内容
大致了解实验室自xx年开始启动的.srb抑制课题的一些工艺原理流程
硫酸盐还原菌(srb)是导致大庆油田地面系统产生硫化物从而造成设备腐蚀、滤料污染等危害的根源;实验室立足于微生物生态抑制,改变以往追求杀灭srb数量的目的,转而以抑制srb活性为目的,是大庆油田系统控制srb危害的新方法,可降低生产运行成本
本研究采用的折流板反应器有7个单元格,每个单元格长*宽*高=9.5cm*12cm*42cm,有效体积4.4l,单元格内装1/3高度的活性污泥.反应器上部为排气孔,排气孔的导气管伸到水封瓶液面以下,保持整个系统厌氧状态.
水箱中的水通过泵泵入反应器,以推流形式流过各单元格,并从反应器流出。
反应器的启动与运行
将含有大量的硫酸盐还原菌的厌氧污泥,接种到反应器中;
现阶段,反应器进水为配制的模拟水,在自来水中加入碳源(白糖)、硫酸钠、少量复合肥,用碳酸氢钠调节碱度;浓度:cod=1800mg/l,so42-=600mg/l左右;进水流量46l/d, 每个单元格水力停留时间(hrt)=2.3hr
一、微生物镜下观察
g氏染色
步骤为:涂片→固定→结晶紫色染色→水洗→碘液媒染→水洗→酒精脱色→番红复染→水洗→干燥→观察。
涂片 与单染色法相同。
固定 与单染色法相同。
结晶紫染色 染色1分钟,然后水洗并用吸水纸吸干。
碘液媒染 染色1分钟,然后水洗并吸干。
酒精脱色 用95%酒精脱色,直到酒精不出现紫色时即停止(大约半分钟),然后立即水洗,并吸干。
番红复染 染色3分钟左右,然后水洗并吸干。
镜检 在显微镜油镜头下观察,菌体显蓝紫色的为革兰氏阳性菌;菌体显红色的为革兰氏阴性菌。
srb为革兰氏阴性菌(具体操作中由于番红变质几次实验结果均不理想)
二、厌氧型为生物的培养(srb和dnb的富集)
1.srb菌
采用
hungate厌氧操作技术、绝迹稀释法(mpn)以及“滚管”培养对样本进行分离,多次纯化获得纯菌株srb。
具体方法:向改良后starkey培养基(k2hpo4 0.5g,nh4ci 1.0g ,na2so4 10g ,caci22h2o 0.1g ,mgso47h2o 2.0g,酵母膏 6.0g ,60%的乳酸钠溶液 6ml,蒸馏水1000 ml,ph=7.8)中加入0.2%的刃天青溶液,培养基煮沸后,加入l-半光盐酸盐0.5g,通入高纯氮气驱氧30min,121℃灭菌20min,固体培养基加入16%的琼脂糖。
单独配 3%的feso4(nh4)2 so4 厌氧
srb菌株于液体培养基中37℃培养48h 后, 在olympus cover-018光学显微镜下革兰氏染色观察。
2.dnb菌
方法同srb菌,ph值最好在7,
药品:
(nh4 ) 2so4 3 g, kcl 0.1 g, k2hpo4 0.5 g, m gso47h2o 0.5g,
ca (no3 )2 0.01 g, feso47h2o 8.0 g, 蒸馏水1 000 ml
121℃灭菌15 m in。
恒温摇床培养箱振荡培养
由于此项操作开始时间较晚,至实习结束,菌落还未完成一个完整周期的培养。
三、水生细菌的计数
1.血球板计数法
取样:先清洗一个容量为100毫升的取样瓶或烧杯。取样前轻轻振荡试管搅拌,待分布均匀后,立即用注射器针管(无菌)取样,取样的量为1毫升。加蒸馏水100倍稀释。
样品放于计数板:放置前必须将血球计数板和盖玻片清洗干净、擦干,不能有油污染和杂质。将血球计数板平放在桌子上,盖好盖玻片;然后把样品瓶轻轻摇动几下,菌分布均匀,并立即用干净的微吸管取样品,迅速把微细吸管放到盖玻片的边缘处,轻压微细吸管的橡皮帽,使样品流入计数板内。注意控制样品流入量,不能过多,过多则流入到沟内;也不能过少,过少则计数时不准确(计数后的数量一般偏少),应充满画线方格及其周边部分。还应注意盖玻片下不能有气泡存在,否则会造成计数不准确。样品吸入血球计数板后,稍停1分钟,待细菌沉降在玻片表面上再在显微镜下进行计数。
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