生物安全规程9篇

内容

一、实验室生物安全规定

1. 所有实验室人员必须接受生物安全培训，并通过相关考试才能进入实验室。

2. 实验室内应穿戴适当的防护装备，如实验服、防护眼镜和手套。

3. 操作微生物样本时，必须在生物安全柜内进行，确保无菌操作。

4. 废弃物应妥善处理，使用专用的生物危害废物容器收集，并及时消毒销毁。

5. 实验结束后，工作台面和设备需进行清洁和消毒。

6. 确保实验室内的紧急设备如灭火器、急救箱和洗眼装置处于良好状态。

二、实验室管理与维护

1. 实验室应定期进行清洁和消毒，保持整洁的工作环境。

2. 实验室负责人应定期检查安全设施和设备，确保其功能正常。

3. 所有实验活动应记录在案，包括实验目的、方法、结果和异常情况。

4. 对于高风险实验，需提前提交风险评估报告，并获得批准后方可执行。

5. 实验室人员变动应及时更新安全培训档案和授权名单。

三、生物样本的储存与运输

1. 生物样本应储存在指定的低温设备中，定期检查温度记录。

2. 样本的转移需遵循特定程序，确保在运输过程中不发生泄漏。

3. 储存和运输过程中，应使用生物危害标签，明确警示信息。

4. 对于易挥发或敏感的样本，需特别注明储存和处理条件。

四、意外事故应对

1. 发生生物安全事故时，立即启动应急预案，隔离事故区域。

2. 受伤人员应立即进行初步处理，并迅速就医。

3. 对事故进行详细记录，分析原因，制定预防措施。

五、持续改进与监督

1. 定期进行生物安全审核，评估并改进现有程序。

2. 鼓励实验室人员提出安全建议，建立反馈机制。

3. 与相关部门保持沟通，确保生物安全法规的更新和遵守。

标准

1. 符合国家及行业相关的生物安全法规和标准，如《实验室生物安全通用准则》。

2. 实验室应通过iso 17025或同等国际认证，证明其质量管理能力。

3. 员工生物安全培训应符合osha（美国职业安全与健康管理局）或类似机构的要求。

4. 实验室的生物安全等级应与所从事的研究活动相匹配，如bsl-1至bsl-4等级。

考试题及答案

1. 问：在生物实验室工作时，哪项防护装备是必需的？

答：实验服、防护眼镜和手套。

2. 问：生物样本的储存应如何进行？

答：生物样本应储存在指定的低温设备中，定期检查温度记录。

3. 问：发生生物安全事故时，首要行动是什么？

答：立即启动应急预案，隔离事故区域。

4. 问：实验室应如何处理废弃的生物样本？

答：使用专用的生物危害废物容器收集，并及时消毒销毁。

5. 问：实验室人员变动对生物安全有何影响？

答：需要更新安全培训档案和授权名单，确保所有工作人员都了解并遵守生物安全规程。

生物安全规程范文

第1篇 生物除臭系统安全操作规程

一、安全运行准备

1、在plc柜上设置散水泵启闭间隔时间:散水间隔时间为每1小时,散水时间120秒。

2、检查除臭系统各部位连接是否正常,闸阀是否开启到位,储水箱水位是否满足运行要求,是否有跑冒滴漏现象。

二、安全启动、关闭操作

(一)手动控制

1、启动运行

将控制柜面板上旋转开关(风机、散水泵a、散水泵b)旋转至“手动”位置,按下按钮“启动开关”,按钮指示灯变亮。

2、停止运行

按下红色按钮“停止开关”。停止成功后指示灯不亮。

(二)自动控制

1、启动运行

将控制柜面板上旋转开关(风机、散水泵a、散水泵b)旋转至“自动”位置,所有设备按程序设置自动运行,控制面板上按钮绿色指示灯亮。

2、停止运行

将控制面板上旋转开关旋转至“手动”位置,所有设备按程序设置自动停止,控制面板上按钮绿色指示灯不亮。

三、安全注意事项

1、本系统为24小时运行,禁止无故关闭除臭系统(维修保养除外)。

2、禁止任何人员私自在控制面板调整系统运行参数。

3、进入除臭塔进行维保作业时,应按照有限空间作业管理制度执行。

第2篇 b2型生物安全柜使用操作规程

1. 操作前,要彻底了解生物安全实验室的相关知识,生物安全柜的操作规程及操作中所需设备的操作方法。

2. 确认玻璃窗处于关闭位置后,打开紫外灯,对安全柜内工作空间进行灭菌。

3. 灭菌结束后,关闭uv灯。

4. 抬起玻璃门至正常工作位置。

5. 打开外排风机。

6. 打开荧光灯及内置风机。

7. 检查回风格栅,使之不要被物品堵塞,注意压力指示表读数并记录每次实验时压力指示表的读数。

8. 在无任何阻碍状态下,让安全柜至少工作10分钟。

9. 用消毒液彻底清洗手及手臂。

10. 穿上带有松紧口袖口的长袖工作褂,戴橡胶手套并套在袖口上,戴防护眼镜,如有必要的话,戴上防护面罩。

11. 用70%乙醇或中性消毒液擦拭安全柜内表面,再用纯水将乙醇或中性消毒液擦拭干净,并使之干燥。

12. 必须按实验程序放入实验材料,尽量将所需要的物品在正式操作前全部放入安全柜,但不要过载,不要挡住前后风口。如所放置的物品较大,可抬高玻璃窗,并按“静音”按键消除报警声音。

13. 将玻璃窗恢复到正常位置。

14. 放入实验材料及设备后,等2-3分钟,将工作区域内的空气尘埃清除掉。

15. 保持所有的实验材料离玻璃门至少4”,对有污染的物品要尽可能放到工

作区域的后面操作。

16. 要将工作区域内的污染物质与洁净物质分开放置。

17. 尽量不要将污染物质放到洁净区域内。

18. 在操作期间,避免随便移动材料,避免操作者的手臂在前方开口处频繁移动;尽量减少气流干扰,如要尽量避免在工作时有人进出室内或在操作者背后走动。

19. 尽量不要使用明火。

20. 使用适当的灭菌技术。

21. 避免使用可干扰安全柜内气流流动的装置和程序。

22. 在操作过程中,如果有物质溢出或液体溅出,在将物品移出安全柜前,

一定要对其表面进行消毒,为防止安全柜内有任何残留的污染物,在安全柜工作过程中,就要将安全柜内表面全部消毒。

23. 全部工作结束后,让安全柜在无任何阻碍的情况下继续至少工作5分钟,以清除工作区域内浮沉污染。

24. 所有接触了污染材料的物体,在从安全柜中取出前,要进行表面消毒。

25. 所有开口容器,从安全柜中拿出前要盖好。

26. 用70%的乙醇或适当的中性消毒剂,擦拭安全柜内表面,再用纯水将乙醇或中性消毒液擦拭干净,并使之干燥。

27. 关闭荧光灯和安全柜风机。

28. 关闭外排风机。

29. 关闭玻璃门,打开uv灯消毒。

30. 灭菌结束后,关闭uv灯。

31. 定期抬起工作区域下面板,擦拭或冲洗工作面底下空间。

第3篇 醇基燃料生物醇油使用安全操作规程终

第一条 为进一步规范集团所属各单位使用、贮存醇基燃料，加强对醇基燃料的安全管理，预防和杜绝生产安全事故，保障企业员工生命财产安全，结合公司实际，特制定本规程。

第二条 醇基燃料仅限于集团所属各单位职工食堂的使用和储存。

本操作规程中涉及到的醇基燃料（生物醇油）是以甲醇等醇类为主要原料，按特定的工艺流程，经科学设计合理改性的一种高清洁新型液体燃料。可替代液化气、煤油、柴油等用于餐饮或工业锅炉等等。

第三条 醇基燃料入厂前的安全检查

（一）运输的汽车驾驶员、押运员必须持有危险化学品运输及押运许可证；

（二）运输车必须保证车况良好，罐体应与车体固定牢靠；

（三）罐体外表无明显变形和损坏、并装有除静电、阻火器等相应的安全装置；

（四）安全阀在检验合格周期内；

第四条 醇基燃料装卸时注意事项

（一）在装卸时要仔细检查储罐液位的变化情况，如发现异常情况，应立即停下装卸泵，关闭泵出口阀，关闭槽车的紧急切断阀，准确排除异常故障；

（二）卸车完成后，立即关闭装卸泵出口阀，停泵，关闭输出阀，拆下快装接头放入接装桶，防止燃料喷洒；

（三）卸车完成后，现场管理人员要认真填写充装记录、日期、单位、车号、容积及充装人；

第五条 醇基燃料贮存时注意事项

用于临时性存储的醇基燃料简易库房，在搭建时应考虑以下几个方面的内容：

（一）库房的材料应选用防火材料；

（二）库房内应保证阴凉、通风良好，远离火种、热源。库温不宜超过37℃。因此，库房应设置强制通风的引风机，在环境温度高时，应定期对库房进行换风；

（三）库房周边10米范围内避免静电的产生；

（四）库房内设置防爆照明设施；

（五）建立定期巡检制度，对库房内使用可燃气体检测仪检查是否有泄漏，同时对桶进行外观检查，并检查库房内的温度、通风情况；

（六）库房内配置足够数量的灭火器或消防栓；

第六条 醇基燃料使用安全操作规则

（一）点火前，打开燃料箱开关并检查开关及管路有无漏液现象；

（二）点燃引火棒再打开燃烧器开关；

（三）燃料流入燃烧器内开始点火，燃料流入不宜过多；

（四）燃料引燃后逐步增加鼓风机风量并调节油阀，风和燃料要匹配，调节到最佳状态使用；

（五）根据实际需要随时调控火势，调控时应当稳火慢调，切勿大动作旋动油阀开关，以便节省燃料；

（六）使用结束后要先关闭油阀，待灶头内的燃料基本燃烧殆尽，然后在关闭鼓风机，以防止燃料逆流发生串烧或外溢；

第七条 醇基燃料安全使用注意事项

（一）燃料箱要远离火源，要有防火措施；

（二）本产品只做燃料使用，严禁食品及其他用途；

（三）在使用过程中不慎溅到眼睛时立即用清水冲洗；

（四）燃料箱及管路进行日常检查防止泄露引发火灾；

（五）要求燃料供方定期对燃料箱及管路进行检查及维保工作，并认真填写相关记录；

（六）操作空间应安装通风装置保持空气流通；

（七）如果不慎引发火灾，应先关闭室内油路开关，断开电源（防止电击），用水（醇基燃料用水可以稀释）或干粉灭火自救。如果无法关闭室内油路开关，可到室外燃料储放容器处关闭总开关，防止事故扩大。

第八条 急救措施

（一）皮肤接触：直接用大量清水冲洗皮肤，最好淋浴。在冲洗过程中脱掉弄脏的衣服，如果起泡或出现红斑就需请求医生治疗；

（二）眼睛接触：若不慎溅入眼中，立即大量清水冲冼，并睁着眼睛直接在清水中浸泡至少15分钟，紧急求医；

（三）吸入：脱离受污染环境，保持温暖并静养。呼吸困难时要输氧。如果人员出现昏迷、呼吸停止及心脏停止跳动，立即给予胸外挤压起博心脏，并立即拨打120紧急医治；

（四）食入：用清水冲洗嘴外部，喝一些冷水或牛奶来缓和影响部位，同时拨打120紧急医治；

第九条 存在的风险特性

（一）其蒸汽与空气形成爆炸性混合物，遇明火、高热能引起燃烧爆炸，若遇高热，容器内压增大，有开裂、爆炸的危险。

（二）燃烧易产生有害物质（如一氧化碳、二氧化碳 ），通风设施完好；

（三）醇基燃料工作场所严禁吸烟、进食和饮水；

（四）严禁在容器和容器附近切割、刺破、焊接及动火作业；

第十条 泄漏应急处理

（一）如大量泄漏，利用围堰阻挡其溢出，可以用大量水冲洗，经稀释的洗液排入废水系统或用沙土、石灰石粉混合，然后收集转移至安全地带；

（二）如有溅出的危险，就要穿戴pvc或橡胶靴及其它不可渗漏的衣服；

（三）如空气中浓度超标时，建议佩戴防毒面具，紧急事态抢救或撤离时，应该佩戴自给式空气呼吸器；

第4篇 潜水推进器（生物选择区）潜水搅拌机(贮泥池)安全操作规程

1、认真阅读搅拌器使用说明书,了解基本结构和原理

2、搅拌器操作步骤

2.1合上控制箱内各个空气开关,旋开“急停按钮”,观察控制面板上指示灯的指示情况,当“电源指示”灯亮,“停止指示”灯亮,“故障指示”灯不亮时,可以启动设备。

2.2将“手动/停止/自动”档位切换开关置于“手动”档,按下“起动”按钮,即可起动设备,按下“停止”按钮,即可停止设备。

2.3将“手动/停止/自动”档位切换开关置于“自动”档,即可远程在中控室启动和停止设备。

注:当“故障指示”灯亮时,必须消除故障后才能启动设备

第5篇 生物脱酚安全操作规程

（1）上岗穿戴好劳保用品，接触化学药品须戴橡胶手套。

（2）开工必须检查送水送风管道是否畅通。

（3）有毒有害药品要有专人保管，并严格按规定领取。

（4）化学试剂必须保持标签完好，以免误操作发生意外。

（5）化验操作过程中必须保持化验室通风良好。

（6）葫芦吊工作时，要严格检查钢丝绳是否有磨损，起吊时底部人员要及时离开。

第6篇 醇基燃料生物醇油使用安全操作规程

第一条 为进一步规范集团所属各单位使用、贮存醇基燃料,加强对醇基燃料的安全管理,预防和杜绝生产安全事故,保障企业员工生命财产安全,结合公司实际,特制定本规程。

第二条 醇基燃料仅限于集团所属各单位职工食堂的使用和储存。

本操作规程中涉及到的醇基燃料(生物醇油)是以甲醇等醇类为主要原料,按特定的工艺流程,经科学设计合理改性的一种高清洁新型液体燃料。可替代液化气、煤油、柴油等用于餐饮或工业锅炉等等。

第三条 醇基燃料入厂前的安全检查

(一)运输的汽车驾驶员、押运员必须持有危险化学品运输及押运许可证;

(二)运输车必须保证车况良好,罐体应与车体固定牢靠;

(三)罐体外表无明显变形和损坏、并装有除静电、阻火器等相应的安全装置;

(四)安全阀在检验合格周期内;

第四条 醇基燃料装卸时注意事项

(一)在装卸时要仔细检查储罐液位的变化情况,如发现异常情况,应立即停下装卸泵,关闭泵出口阀,关闭槽车的紧急切断阀,准确排除异常故障;

(二)卸车完成后,立即关闭装卸泵出口阀,停泵,关闭输出阀,拆下快装接头放入接装桶,防止燃料喷洒;

(三)卸车完成后,现场管理人员要认真填写充装记录、日期、单位、车号、容积及充装人;

第五条 醇基燃料贮存时注意事项

用于临时性存储的醇基燃料简易库房,在搭建时应考虑以下几个方面的内容:

(一)库房的材料应选用防火材料;

(二)库房内应保证阴凉、通风良好,远离火种、热源。库温不宜超过37℃。因此,库房应设置强制通风的引风机,在环境温度高时,应定期对库房进行换风;

(三)库房周边10米范围内避免静电的产生;

(四)库房内设置防爆照明设施;

(五)建立定期巡检制度,对库房内使用可燃气体检测仪检查是否有泄漏,同时对桶进行外观检查,并检查库房内的温度、通风情况;

(六)库房内配置足够数量的灭火器或消防栓;

第六条 醇基燃料使用安全操作规则

(一)点火前,打开燃料箱开关并检查开关及管路有无漏液现象;

(二)点燃引火棒再打开燃烧器开关;

(三)燃料流入燃烧器内开始点火,燃料流入不宜过多;

(四)燃料引燃后逐步增加鼓风机风量并调节油阀,风和燃料要匹配,调节到最佳状态使用;

(五)根据实际需要随时调控火势,调控时应当稳火慢调,切勿大动作旋动油阀开关,以便节省燃料;

(六)使用结束后要先关闭油阀,待灶头内的燃料基本燃烧殆尽,然后在关闭鼓风机,以防止燃料逆流发生串烧或外溢;

第七条 醇基燃料安全使用注意事项

(一)燃料箱要远离火源,要有防火措施;

(二)本产品只做燃料使用,严禁食品及其他用途;

(三)在使用过程中不慎溅到眼睛时立即用清水冲洗;

(四)燃料箱及管路进行日常检查防止泄露引发火灾;

(五)要求燃料供方定期对燃料箱及管路进行检查及维保工作,并认真填写相关记录;

(六)操作空间应安装通风装置保持空气流通;

(七)如果不慎引发火灾,应先关闭室内油路开关,断开电源(防止电击),用水(醇基燃料用水可以稀释)或干粉灭火自救。如果无法关闭室内油路开关,可到室外燃料储放容器处关闭总开关,防止事故扩大。

第八条 急救措施

(一)皮肤接触:直接用大量清水冲洗皮肤,最好淋浴。在冲洗过程中脱掉弄脏的衣服,如果起泡或出现红斑就需请求医生治疗;

(二)眼睛接触:若不慎溅入眼中,立即大量清水冲冼,并睁着眼睛直接在清水中浸泡至少15分钟,紧急求医;

(三)吸入:脱离受污染环境,保持温暖并静养。呼吸困难时要输氧。如果人员出现昏迷、呼吸停止及心脏停止跳动,立即给予胸外挤压起博心脏,并立即拨打120紧急医治;

(四)食入:用清水冲洗嘴外部,喝一些冷水或牛奶来缓和影响部位,同时拨打120紧急医治;

第九条 存在的风险特性

(一)其蒸汽与空气形成爆炸性混合物,遇明火、高热能引起燃烧爆炸,若遇高热,容器内压增大,有开裂、爆炸的危险。

(二)燃烧易产生有害物质(如一氧化碳、二氧化碳),通风设施完好;

(三)醇基燃料工作场所严禁吸烟、进食和饮水;

(四)严禁在容器和容器附近切割、刺破、焊接及动火作业;

第十条 泄漏应急处理

(一)如大量泄漏,利用围堰阻挡其溢出,可以用大量水冲洗,经稀释的洗液排入废水系统或用沙土、石灰石粉混合,然后收集转移至安全地带;

(二)如有溅出的危险,就要穿戴pvc或橡胶靴及其它不可渗漏的衣服;

(三)如空气中浓度超标时,建议佩戴防毒面具,紧急事态抢救或撤离时,应该佩戴自给式空气呼吸器;

第7篇 潜水推进器生物选择区和潜水搅拌机贮泥池安全操作规程

1、认真阅读搅拌器使用说明书，了解基本结构和原理

2、搅拌器操作步骤

2.1合上控制箱内各个空气开关，旋开“急停按钮”，观察控制面板上指示灯的指示情况，当“电源指示”灯亮，“停止指示”灯亮，“故障指示”灯不亮时，可以启动设备。

2.2将“手动/停止/自动”档位切换开关置于“手动”档，按下“起动”按钮，即可起动设备，按下“停止”按钮，即可停止设备。

2.3将“手动/停止/自动”档位切换开关置于“自动”档，即可远程在中控室启动和停止设备。

注：当“故障指示”灯亮时，必须消除故障后才能启动设备

第8篇 生物安全柜使用的操作规程

1．每次使用前应检查生物安全柜的正常指标，包括风速、气流量和负压在正常范围。若出现异常应停止使用，进行检修工作。

2．在使用中不能打开玻璃观察窗。

3．生物安全柜内应尽量少放器材或样品，不能影响后部压力排风系统的气流循环。

4．生物安全柜内不能使用酒精灯，允许使用微型电加热器，最好使用一次性无菌接种环。

5．所有工作必须在工作台面的中后部进行，并能够通过玻璃观察挡板看到。操作者不要频繁移动手臂及挥动手臂以免破坏定向气流。

6．尽量减少操作者身后的人员走动以及快速开关房间的门，以防止对生物安全柜的气流造成影响。

7．操作时废物袋以及盛放废弃吸管的容器等必须放在安全柜内而不应放在安全柜之外。污染的吸管、容器等应先在放于安全柜内的装有消毒液的容器中消毒1h以上，方可转入医疗废物专用垃圾袋中进行高压灭菌等处理。

8．洁净物品和使用过的污染物品要分开放在不同区域，工作台面上的操作应按照从清洁区到污染区的方向进行，以避免交叉污染。

9．工作开始前和结束后，安全柜的风机至少运行5min，工作完成后应使用适当的消毒剂对生物安全柜的表面进行擦拭。

10．生物安全柜内不能进行文字工作。

第9篇 微生物实验室生物安全操作规程

一、目的

制订本规则，保证实验室工作人员的健康安全、实验设备安全卫生以及防止对外界环境造成污染。

二、适用范围

适用于所有进入微生物实验室人员。实验室工作人员必需严格遵守安全操作规程。

三、安全操作规程：

1.员工安全操作规程

1.1 实验室入口处须贴上生物危险标志，注明危险因子、生物安全级别、负责人姓名和电话、进入实验室的特殊要求及离开实验室的程序。

1.2 禁止非工作人员进入实验室。参观实验室等特殊情况须经实验室负责人批准后方可进入，做好卫生防护，并在有关人员陪同下方可进入，同时注意做好环境维护及保密工作。

1.3 进行感染性实验时，禁止他人进入实验室，或必须经实验室负责人同意后方可进入。免疫耐受或正在使用免疫抑制剂的工作人员必须经实验室负责人同意方可在实验室工作。

1.4 接触微生物或含有微生物的物品后，脱掉手套后和离开实验室前要洗手。

1.5 禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及储存食物。

1.6 尽量以移液器吸取液体，禁止口吸。

1.7 实验过程中，严格按有关操作规程操作，降低溅出和气溶胶的产生。

1.8 每天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出后要随时用75%乙醇或巴氏消毒液消毒。

1.9 实验人员在配制培养基过程中，需尽量避免接触性或吸入性危害，特别是配制ttb和碘液等对人体有害的培养基或试剂时，要穿戴工作服、口罩和手套，并在通风橱中进行。

1.10工作人员应接受必要的免疫接种和检测(如乙型肝炎疫苗、卡介苗等)。工作人员要接受有关的潜在危险知识的培训，掌握预防暴露以及暴露后的处理程序。每年要接受一次最新的培训。人员暴露于感染性物质时，及时向实验室负责人汇报，并记录事故经过和处理方案。

1.11禁止将无关动物带入实验室。

2.无菌室安全操作规程

2.1无菌培养室每天都要用0.2%的新洁尔灭拖洗地面一次(拖布专用)，紫外线照射消毒30min以上，超净工作台台面每次实验前要用75％酒精擦洗。然后紫外线消毒30min。操作用具如移液器、废液缸、污物盒、试管架等用75%酒精擦洗后置于台内同时紫外线消毒。

2.2无菌室应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染。

2.3无菌室应备有工作浓度的消毒液，如5％的甲酚溶液，75％的酒精，0.1％的新洁尔灭溶液，等等。

2.4无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁，以保证无菌室的洁净度符合要求。

2.5需要带入无菌室使用的器械、平皿等一切物品，均应包扎严密，并应经过适宜的方法灭菌。

2.6工作人员进入无菌室前，必须用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在缓冲间更换专用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用75% 乙醇等消毒剂再次擦拭双手)，方可进入无菌室进行操作。

2.7无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟，灭菌后通无菌风至少30min以上人员才能进入。操作完毕，应及时清理无菌室，再用紫外灯辐照灭菌30分钟。

2.8供试品在检查前，应保持外包装完整，不得开启，以防污染。检查前，用75％的酒精棉球消毒外表面。

2.9每次操作过程中，均应做阴性对照，以检查无菌操作的可靠性。

2.10吸取菌液时，必须用移液器吸取，切勿直接用口接触吸管。

2.11接种针每次使用前后，必须通过火焰灼烧灭菌，待冷却后，方可接种培养物。

2.12带有菌液的吸管，试管，培养皿等器皿应浸泡在盛有5%来苏尔溶液或巴氏消毒液的消毒桶内消毒，24小时后取出冲洗。

2.13如有菌液洒在桌上或地上，应立即用5%石碳酸溶液或3％的来苏尔倾覆在被污染处至少30分钟，再做处理。工作衣帽等受到菌液污染时，应立即脱去，高压蒸汽灭菌后洗涤。

2.14凡带有活菌的物品，必须经消毒后，才能在水龙头下冲洗，严禁污染下水道。

2.15无菌室应每月检查菌落数。在层流无菌风开启的状态下，取内径90mm的无菌营养琼脂平板5个，分别放置无菌室四周及中央位置，开盖暴露30分钟后，倒置于36℃培养箱培养48小时，取出检查。100级洁净区平板杂菌数平均不得超过1个菌落/平皿，10000级洁净室平均不得超过3个菌落/平皿。如超过限度，应用臭氧发生器等对无菌室进行彻底消毒，直至重复检查合乎要求为止。

3.压力蒸汽灭菌器的安全使用操作程序：

3.1堆放：将需灭菌的物品予以妥善包扎，各包之间留有空隙，依次堆放在灭菌桶的筛板上，以蒸汽穿透，提高灭菌效果。需灭菌物品外需黏上高压指示胶带以检验灭菌温度是否达到要求。

3.2 加水：在锅体内注入生活用水，水位一定要超过电热管2厘米以上（不宜过多）；连续使用时，每次操作前，必须补足上述水位，以免烧坏电热管和意外发生。

3.3 密封：在每次使用高压锅前，都必须认真检查高压锅的出气伐和安全阀，确保其状态完好，如有故障，在故障排除之前不得使用高压灭菌锅。把堆放好物品的灭菌桶放在锅体内，盖上锅盖并锁紧。

3.4 加热灭菌：将灭菌器接通与铭牌一致的电源，按下电源开关，接通电源，指示灯亮，表示电源已正常输入本器，按下开始按纽电热管开始加热工作；非全自动的高压灭菌锅要注意排空空气，确保灭菌时高压锅内是饱和水蒸气，高压灭菌锅内灭菌期间工作人员需监视高压锅指示面板上的压力、温度和时间等。

3.5 开盖：灭菌结束后，切勿立即将灭菌锅内的蒸汽排出，否则：由于液体物品的温度未能下降，而压力蒸汽突然释放，会使液体剧烈沸腾，造成溢出或容器爆裂。应待压力表指针归零位后，方可开启锅盖。

3.6 灭菌后无菌工器具及培养基应存放于无菌区域（如灭过菌后的无菌室或生物安全柜内），无菌物品需有明确标识。

3.7 每年至少2次用嗜热脂肪芽孢杆菌作为生物指示剂检查灭菌效果并记录，指示物需放在不一达到灭菌的部位（如堆放物品的居中位置）。

4.生物安全柜操作规程

4.1确认玻璃窗处于关闭位置后，打开紫外灯，对安全柜内工作空间进行灭菌。灭菌结束后，关闭紫外灯。安全柜使用前后均需灭菌。

4.2抬起玻璃门至正常工作位置。打开外排风机。打开荧光灯及内置风机。检查回风格栅，使之不要被物品堵塞。在无任何阻碍状态下，让安全柜至少工作10分钟。

4.3用消毒液彻底清洗手及手臂。穿上工作褂，戴橡胶手套并套在袖口上，如有必要的话，戴防护眼镜和防护面罩。

4.4按实验程序放入实验材料，要将工作区域内的污染物质与洁净物质分开放置。

尽量将所需要的物品在正式操作前全部放入安全柜，但不要过载，不要挡住前后风口。

4.5尽量避免使用可干扰安全柜内气流流动的装置和程序。在操作期间，避免随便移动材料，避免操作者的手臂在前方开口处频繁移动，尽量减少气流干扰。

尽量不要使用明火，接种环之类用红外灭菌器灭菌。

4.6在操作过程中，如果有物质溢出或液体溅出，在将物品移出安全柜前，要对其表面进行消毒，为防止安全柜内有任何残留的污染物，在安全柜工作过程中，就要将安全柜内表面全部消毒。所有接触了污染材料的物体，在从安全柜中取出前，要进行表面消毒。所有开口容器，从安全柜中拿出前要盖好。

4.7全部工作结束后，用70%的乙醇或适当的中性消毒剂，擦拭安全柜内表面，让安全柜在无任何阻碍的情况下继续至少工作5分钟，以清除工作区域内浮沉污染。

4.8关闭照明灯和安全柜风机。关闭玻璃门，打开uv灯消毒。灭菌结束后，关闭uv灯。

4.9定期抬起工作区域下面板，擦拭或冲洗工作面底下空间。

5.标准菌株安全操作规程

5.1标准菌株由专人保管。保管人负责建立标准菌株目录；目录至少应包编号、菌株号、菌种名称、来源、购买日期、购买数量、保存方法等。

5.2标准菌株应做好标识后，保存于专用冰箱中。

5.3标准菌株不能随意转借其它单位或个人，需要时，须经实验室负责人批准后方可提供。

5.4必须在生物安全柜中进行标准菌株实验，操作过程中，不要穿戴巳经污染的防护性手套触摸门柄、仪器或污染区以外区域，避免扩大污染范围。

5.5试验结束后，操作过程中所有可能与生物危险物接触或被污染的试验器械和物品，能够高压消毒的必须高压消毒，不能进行高压消毒的物品，应使用有效的消毒剂消毒处理。

5.6 标准菌株传代原则上不超过5代。

6.微生物培养物废弃物安全处理程序

6.1 尽可能使用塑料器材代替玻璃器材,防止利器损伤。非一次性利器必须放入厚壁容器中并运送到特定区域消毒，最好进行高压消毒。

6.2 禁止用手处理破碎的玻璃器具。装有污染针、利器及破碎玻璃的容器在丢弃之前必须应用次氯酸消毒液或其他有效药品进行消毒。

6.3 所有培养物、废弃物在运出实验室之前须经巴氏消毒液消毒处理或高压灭菌后,置于专门污物袋内，交由专业卫生处理公司处置。

6.4 实验设备在运出修理或维护前必须进行消毒。

7、微生物实验室紧急事故处理办法

7.1刺伤、切割伤或擦伤。受伤人员应脱下防护服，清洗双手和受伤部位，使用适当的皮肤消毒剂进行消毒，必要时进行医学处理。同时记录受伤原因和相关的微生物，并保留完整适当的医疗记录。

7.2潜在感染性物质的食入。应脱下受害人的防护服，进行必要的医学处理。报告食入材料的鉴定和事故发生的细节，并保留完整适当的医疗记录。

7.3潜在危害性气溶胶的释放（在生物安全柜以外）。所有人员必须立即撤离相关区域，暴露人员应接受医学咨询，同时立即通知实验室负责人和生物安全负责人。为了使气溶胶排出和使较大的粒子沉降，在一定时间内严禁人员入内，若实验室没有中央通风系统，应推迟进入实验室的时间，同时张贴“禁止进入”的标志。待气溶胶排出、较大的粒子沉降后，在生物安全负责人的指导下，清理人员穿戴适当的防护服和呼吸保护装备进行污染的清除。

7.4容器破碎及感染性物质的溢出。应立即用布或纸巾覆盖被感染性物质污染或受感染性物质溢洒的破碎物品，并倒上消毒剂。作用适当时间后，将覆盖物以及破碎物品清除，再用消毒剂擦拭污染区域。玻璃碎片应用镊子清理，已污染的布、纸巾和抹布等应放在盛放污染性废弃物的容器内。如果用簸箕清理破碎物，应对其进行高压灭菌或放在有效的消毒液内浸泡消毒。所有操作过程中要求戴手套。

若实验表格或其他打印或手写材料被污染，应将这些信息复制后，再将原件置于盛放污染性废弃物的容器内，按废弃物处理的方式进行处理。

7.5未装可封闭离心桶的离心机内盛有潜在感染性物质的离心管发生破裂。如果机器正在运行时发生破裂或怀疑发生破裂，应关闭机器电源，让机器密闭适当时间（如30min），使气溶胶沉积。如果机器停止后发现破裂，不开盖或立即将盖子盖上，并密闭（如30min）。同时应通知生物安全负责人。玻璃碎片应使用镊子，或用镊子夹着棉花进行清理。所有破碎的离心管、玻璃碎片、离心桶、十字轴和转子都应放入无腐蚀性的、已知对相关微生物具有杀灭活性的消毒剂内进行消毒。未破损的带盖离心管应放在另一个有消毒剂的容器中，消毒后回收。离心机内腔应用适当浓度的同种消毒剂多次擦拭，再用水冲洗后干燥。

清理时，应戴结实的手套（如厚橡胶手套），必要时在外面再戴适当的一次性手套。所使用的全部材料都应按感染性废弃物处理。

7.6在可封闭的离心桶（安全杯）内离心管发生破裂。所有的密封离心桶都应在生物安全柜内装卸。若怀疑在安全杯内发生破损，应松开安全杯盖子并将离心桶高压灭菌，也可采用化学消毒的方法进行处理。

7.7生物安全柜内生物危害溢出。等待至少5min，让安全柜充满气溶胶，清理时应穿戴实验服，安全眼镜和手套，且让安全柜继续工作。使用浸泡消毒剂的消毒纸巾吸附溢出物，进行消毒处理应保证一定的接触时间（至少20min）。并用同样的消毒纸巾擦拭安全柜内壁、工作台表面和柜内所有设备。按照正确的生物废弃物处理步骤处理被污染的物质，将可回收的被污染物品放入生物危害物回收袋或高压灭菌盘并且用报纸包起来，然后进行消毒或清理。用消毒剂对无法进行高压灭菌的物品进行至少20 min的消毒处理后再拿出安全柜。最后脱下个人防护服并放进污染物收集袋中进行高压灭菌处理。若所要清理的物品达到2级生物安全水平或者更高，应联系生物安全办公室负责人。

7.8使用消毒剂进行清洁的具体步骤如下：用干纸巾覆盖溢出物(用来吸附液体) 后，再放上浸泡消毒液的纸巾，使消毒剂包围溢出物，并确保消毒剂与污染溢出物充分接触，尽可能减少气溶胶的形成。对溢出物附近的所有物品进行消毒处理，处理一定时间，使消毒剂的消毒作用得到充分发挥。使用正确的消毒剂擦拭设备，并按照正确的生物危害物处理程序处理被污染的物质。对可回收利用的物品进行消毒处理。